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单细胞转录组基础分析一:分析环境搭建
发布日期:2021-03-01浏览:

(内容来源:生信会客厅)

 

单细胞测序技术是近年最大的生命科学突破之一,相关文章频繁发表于各大顶级期刊,然而单细胞数据的分析依然是大家普遍面临的障碍。本专题将针对10X Genomics单细胞转录组数据演示各种主流分析,包括基于Seurat的基础分析、以及基于clusterProfiler、Monocle、SingleR等R包的延伸分析。

 











硬件配置


 

10X Genomics单细胞数据分析对电脑硬件配置要求比较高。上游分析软件Cell Ranger最低配置要求8核CPU+64G内存,推荐配置为16核CPU+128G内存,这显然不是个人电脑可以胜任的。下游分析使用R语言Seurat包时,10000个细胞的表达矩阵,8G内存的电脑就不能应付了。因此没有服务器的同学不用考虑上游分析,仅做下游分析最低也要16G内存的电脑。

 











R语言的安装


 

R语言安装程序官方下载链接:https://cran.r-project.org/

 

1.windows版本选择红色箭头所示链接

 

 

2.点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指链接

 

 

3.点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指链接

注意:不要安装最新的R语言4.0版本,很多包还不提供支持!!!

 

 

4.点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指3.6.3版本

 

 

5.点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指3.6.3版本

 

 

安装文件下载后就是常规的windows程序安装过程了

 











Rtools的安装


 

Rtools的相当于R在windows中使用的一个补丁,我只在安装R包的时候遇到过rtools报错,其它时候没感觉到它的存在。官方解释如下:

Rtools provides a toolchain for Windows platform that work well with R. It mainly includes GNU make, GNU gcc, and other utilities commonly used on UNIX-ish platform. R statistical language & environment is that it is open source and cross-platform.

 

Rtools下载地址:

https://cran.r-project.org/bin/windows/Rtools/history.html

 

下载箭头所示版本安装即可,注意以下安装界面:

红框标注的两个选项一定都要选择,第一个选项默认是没打钩的。
 











RStudio的安装


 

Rstudio的下载链接:https://rstudio.com/products/rstudio/download/

 

1.选择红色箭头所示链接

 

 

 

2.点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指链接

 

安装文件下载后就是常规的windows程序安装过程了

 











Rstudio界面下安装分析所用的R包


 

使用代码安装R包

 

1.打开RStudio,同时按住键盘上Ctrl+Shift+H三个键,切换到工作目录,逐行运行以下命令:

	install.packages("devtools", dependencies=T)install.packages("BiocManager", dependencies=T)install.packages("tidyverse", dependencies=T)install.packages('Seurat', dependencies=T)BiocManager::install(c("SingleR","monocle", "DESeq2"),ask = F,update = F) BiocManager::install(c("clusterProfiler","DOSE","pheatmap"),ask = F,update = F)BiocManager::install(c("org.Hs.eg.db","org.Mm.eg.db","org.Rn.eg.db"),ask = F,update = F)devtools::install_github('RGLab/MAST', upgrade=F, build_vignettes = T)library(Seurat)

 

2.运行library(Seurat)后会提示(只有首次运行会提示)安装minconda和python,如下图所示:

3.输入y继续。安装过程中360安全卫士会提示病毒风险,选择信任即可。

 

至此,分析环境搭建完成!

 











获取帮助


 

本教程的目的在于把常用的单细胞分析流程串起来,适合有一定R语言基础的朋友参考。分析原理和代码官网有详细的教程和权威的解释,翻译好的中文教程也有多个版本,有兴趣的可以搜索一下。



 

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